UV1700紫外可见分光光度计法测磷方法

本法系将有机磷转变为无机磷后进行磷含量测定。磷

酸根在酸性溶液中与钼酸铵生成磷钼酸铵，遇还原剂即生

成蓝色物质（三氧化钼和五氧化钼的混合物），称之为

“钼蓝”，用比色法测定供试品中磷含量。

测定法精密量取供试品适量（含磷4?20网）置试

管中，加4 滴硫酸（约0.08ml)加热至炭化，再加2 滴高

氯酸（约0.06ml)消化至无色澄清，消化*后稍置片

刻，立即加水2ml，加0.04mol/L钼酸铵溶液（称取钼酸

铵5g，加水溶解并稀释至100ml) 0.4ml，混匀；加还原

剂（称取亚硫酸氢钠6g、亚硫酸钠1.2g、1-氨基-2-萘酚-

4-磺酸0. lg，置棕色瓶中，加水至50ml，1 周内使用）

0. 2 m l ,混匀；加水至6ml，15?2 0分钟后，照紫外-可见

分光光度法（通则0401)，在波长82 0 m n处测定吸光度。

精密量取标准磷溶液（精密称取干燥至恒重的磷酸二

氢钾439. 3 m g，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻

度；再精密量取2ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻

度，即得每lml含磷20叫的标准磷溶液）0.2ml、0.4ml、

0.6ml、0.8ml、1.0ml，分别置试管中，各补加水至lml，

自“加4 滴硫酸”起，同法操作，测定各管的吸光度。

以标准磷溶液的系列浓度对其相应的吸光度作直线回

归，然后将供试品溶液的吸光度代人直线回归方程，求出其相应体积（ml)。

磷含量（pg/ml) = Cr

v x

式中 V 为供试品溶液吸光度相对于标准磷溶液的体

积，ml;

cR 为标准磷溶液的浓度，Fg/mh

V x 为供试品的体积，ml。 _

【附注】（1 ) 加高氯酸消化时，必要时可加1?2 滴

3 0 %过氧化氢，但zui后必须将过氧化氢除尽。

( 2 )加高氯酸消化后，如在冷却后加水，须再加热。

( 3 )测定A 群脑膜炎奈瑟球菌多糖疫苗成品磷含量

时，至少取3 支安瓿溶解后混合备用。